一、試劑準(zhǔn)備 1、SDS-PAGE 試劑：見聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)。 2、勻漿緩沖液：1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml；10%SDS 6.0 ml；β-巰基乙醇 0.2 ml；ddH2O 2.8 ml。 3、轉(zhuǎn)膜緩沖液：甘氨酸 2.9 g；Tris 5.8 g；SDS 0.37 g；甲醇 200 ml；加 ddH2O 定容至 1000 ml。 4.、0.01 M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0 g；KCl 0.2 g；Na2 HPO4 1.44 g；KH2PO40.24 g；加 ddH2O 至 1000 ml。 5、膜染色液：考馬斯亮蘭 0.2 g；甲醇 80 ml；乙酸 2 ml；ddH2O118 ml。包被液（5% 脫脂奶粉，現(xiàn)配）：脫脂奶粉 1.0 g 溶于 20 ml 的 0.01 M PBS 中。 6、顯色液：DAB 6.0 mg；0.01 M PBS 10.0 ml；硫酸鎳胺 0.1 ml；H202 1.0 μl。
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免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。
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根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定，HIV抗體陽(yáng)性報(bào)告必須由衛(wèi)生部認(rèn)證并取得資格的艾滋病病毒抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室出具才有法律效應(yīng)。最常用的HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法是免疫印跡法（Western Blot，WB）。HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)：免疫印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是根據(jù)硝酸纖維素條膜特異性HIV抗原位置上出現(xiàn)的帶型不同來(lái)判斷HIV抗體為陽(yáng)性、陰性和不確定。
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